細(xì)胞名稱 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞；201184
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雌性長白山豬胚胎的皮膚。2011年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測:
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞；201184 | 貼壁生長 | EY-X64079 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
磷化Disabled同源物1檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSphospho-Disabled Homolog 1
組織纖維蛋白溶酶原激活劑檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBStissue plamnipen activator
肉檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBScarnitine
洛絲蛋白檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSReelin
單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSmonocyte chemotactic protein 3
Janus激酶2檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSJanus Kinase 2
總巰基檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSTotal mercapto -SH
神經(jīng)絲蛋白H磷化亞型檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSPhosphorylated neurofilament heavy
組織多肽特異性抗原檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBStissue polypeptide specific antigen
糖類抗原19-9檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)10%FBSCarbonhydrate Antigen 19－9
糖類抗原12－5檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSCarbonhydrate Antigen 12－5
糖類抗原15－3檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSCarbonhydrate Antigen 15－3
C檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSLysozyme C
緊密蛋白連接5檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBSClaudin-5
β1整合素檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSintegrin β1
纖維蛋白原α鏈檢測試劑盒生長特性: 半貼壁生長培養(yǎng)條件: Grace'sInsectMedium(GIMw/oBSA,FCS,WholeEggUltrafiltrate)10%FBSfibrinogen alpha chain
潤滑素檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBSlubricin
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞；201184甘草次(β型)1449-05-4;471-53-4英文名：Glycyrrhetinic acid
英文別名：18-Isoglycyrrhetinic acid; 18α-Glycyrrhetic acid; 18α-Glycyrrhetinic acid;β-Glycyrrhetinic acid
CAS登錄號：1449-05-4;471-53-4
分子式：C30H46O4
分子量：470.69
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色粉末
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：將甘草進(jìn)行水解可得到甘草次。
熔點(diǎn)：281-285℃
旋光度：+140°（乙醇)
藥理藥效：甘草次具有抗炎的功效，藥效顯著。用于治療十二指腸潰瘍、胃潰瘍、血栓癥、燙傷、濕疹和太陽曬斑及急性肝炎等。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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