產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
水牛泰勒蟲(chóng)探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Theileria buffeli | EY00P9424 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
沙棘（標(biāo)準(zhǔn)品）2-苯氧基苯 99%Human RAP1GDS1(Rap1 GTPase-GDP dissociation stimulator 1) ELISA Kit
紅參蘆（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基*基 98%Human PLIN1(Perilipin-1) ELISA Kit
三棱（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基*基 99%Human IFNAR1(Interferon alpha/beta receptor 1) ELISA Kit
（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基*基氯化銨 98%Human SH3GL1(Endophilin-A2) ELISA Kit
五加皮（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基*基氫氧化銨 20%甲溶液Human IKZF1(DNA-binding protein Ikaros) ELISA Kit
羊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基*基氫氧化銨 25%水溶液Human KRT2(KeRatin, type II cytoskeletal 2 epidermal) ELISA Kit
熊膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）三乙基芐基氯化銨 98%Human OPTC(Opticin) ELISA Kit
西藏棱子芹（標(biāo)準(zhǔn)品）芐基三乙基 98%Human DBH(Dopamine beta-hydroxylase) ELISA Kit
茅膏菜（標(biāo)準(zhǔn)品）18-冠-6 99%Human VNN1(Pantetheinase) ELISA Kit
甘青青蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）15-冠-5 97%Human MTDH(Protein LYRIC) ELISA Kit
龍膽（龍膽）（標(biāo)準(zhǔn)品）乙基三苯基化膦 95%Human NANOG(Homeobox protein NANOG) ELISA Kit
母丁香（標(biāo)準(zhǔn)品）甲基三苯基溴化鏻 98%Human MNX1(Motor neuron and pancreas homeobox protein 1) ELISA Kit
蓽澄茄（標(biāo)準(zhǔn)品）四甲基化銨 98%Human OTX2(Homeobox protein OTX2) ELISA Kit
土鱉蟲(chóng)(地鱉)（標(biāo)準(zhǔn)品）四甲基氫氧化銨 AR,25%水溶液Human PIK3CA(Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform) ELISA Kit
虎杖葉（標(biāo)準(zhǔn)品）四丁基氯化銨 離子色譜級(jí), ≥99.0%Human S1PR1(Sphingosine 1-phosphate receptor 1) ELISA Kit
水牛泰勒蟲(chóng)探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒輔肌動(dòng)蛋白α4(ACTN4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
Atrophin 1蛋白(ATN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)烯標(biāo)準(zhǔn)溶液（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
類(lèi)固生成因子1(SF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)磷酸氫二銨 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
皮層肌動(dòng)蛋白(CTTN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)717強(qiáng)堿性I型陰離子交換樹(shù)脂 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
斑聯(lián)蛋白(ZYX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)732強(qiáng)酸苯乙烯陽(yáng)離子交換樹(shù)脂 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
輔肌動(dòng)蛋白α1(ACTN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂(氯型) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂(氯型) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
Pirin蛋白(PIR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹(shù)脂(粒徑0.350 - 0.600 mm) 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
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