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產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>恒河猴皮膚細胞;RM-S1
 
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產品名稱:
恒河猴皮膚細胞;RM-S1
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恒河猴皮膚細胞;RM-S1相關產品:病毒性神經壞死病病毒PCR試劑盒實驗
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  恒河猴皮膚細胞;RM-S1的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

恒河猴皮膚細胞;RM-S1

貼壁生長

EY-X63773

細胞名稱  恒河猴皮膚細胞;RM-S1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雌性獼猴的皮膚組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P4

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
基質裂解蛋白;基質溶素檢測試劑盒細胞名稱: 人胃癌細胞;MGC-803形態(tài)特性: 上皮樣matrilysin

基質裂解素檢測試劑盒細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記人細胞;HeLa-GFP形態(tài)特性: 上皮樣;多角Stromelysin-2

10檢測試劑盒細胞名稱: 人胃癌細胞;MKN-45形態(tài)特性: 圓形Kallikrein 10

11檢測試劑盒細胞名稱: 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2B形態(tài)特性: 多角Kallikrein 11

2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠腎足細胞;Mousepodocyte形態(tài)特性: 多邊Kallikrein 2

6檢測試劑盒細胞名稱: 人肺粘液上皮樣癌細胞;NCI-H292形態(tài)特性: 上皮樣Kallikrein 6

激肽原檢測試劑盒細胞名稱: 人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;MuM-2C形態(tài)特性: 多角Kininogen

激肽原1檢測試劑盒細胞名稱: 人低侵襲性脈絡膜黑色素素瘤細胞;OCM-1A形態(tài)特性: 多角Kininogen 1

集落刺激因子檢測試劑盒細胞名稱: 人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-1形態(tài)特性: 上皮細胞樣colony-stimulating factor

己糖激酶II檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)形態(tài)特性: 圓形Hexokinase II

甲基丙二檢測試劑盒細胞名稱: 人胃腺癌細胞;SGC-7901[SGC7901]形態(tài)特性: 上皮樣methylmalonic acid

甲狀腺刺激素抗體;甲狀腺刺激免疫球蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人導管癌細胞;ZR-75-30形態(tài)特性: 上皮樣Thyroid stimulating antibody

甲狀腺受體相互作用蛋白6檢測試劑盒細胞名稱: 綠色熒光蛋白標記小鼠子細胞;U14-GFP形態(tài)特性: 上皮樣thyroid hormone receptor interactor 6

間皮素檢測試劑盒細胞名稱: 人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I2.1(CRL-2572)形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Mesothelin

降脂素檢測試劑盒細胞名稱: 人膀胱癌細胞;5637(HTB-9)形態(tài)特性: 上皮樣Adipsin

角蛋白,II型細胞骨架1b檢測試劑盒細胞名稱: 人低分化肺腺癌細胞;SK-LU-1形態(tài)特性: 上皮樣Keratin, type II cytoskeletal 1b

窖蛋白Caveolin1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠子細胞;U14形態(tài)特性: 上皮樣Caveolin-1
恒河猴皮膚細胞;RM-S1果糖規(guī)格:25g用途:微生物指示劑

225ml LB1肉湯均質袋規(guī)格:10個/包用途:用于李斯特氏菌制樣和前增菌培養(yǎng)(GB 標準)

乙基紫疊氮鈉肉湯(litsky肉湯)規(guī)格:250g用途:用于鏈球菌增菌培養(yǎng)

改良EC(MEC+n)肉湯規(guī)格:新生霉素用途:4.5mg每支含量

VRB-MUG瓊脂規(guī)格:100g用途:用于大腸桿菌的固體平板檢測(GB標準)

BCYE-CYS瓊脂平板(9cm)規(guī)格:10個/包用途:用于軍團菌的選擇性分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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