細胞名稱 大耳山羊肺細胞；LDG-1
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性大耳山羊的肺組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
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產品名稱 | 大耳山羊肺細胞；LDG-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63768 |
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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玻連蛋白;體外粘連蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠肝細胞；IAR20形態(tài)特性: 圓形、多角vitronectin
補體H因子相關蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 新生牛眼晶體上皮細胞；NBLE形態(tài)特性: 多角complement factor H-related protein 1
補體片段3d檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠前胃癌細胞；MFC形態(tài)特性: 上皮樣Complement fragment 3d
補體片段5b檢測試劑盒細胞名稱: 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞；NBTF形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Complement fragment 5b
補體因子B檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞；RAW264.7[RAW264.7]形態(tài)特性: 不規(guī)則圓形complement factor B
補體因子H檢測試劑盒細胞名稱: 兔角膜后基質層成纖維細胞；RCBBF形態(tài)特性: 成纖維樣complement factor H
叉頭框C2檢測試劑盒細胞名稱: 兔眼Tenon's囊成纖維細胞；RYTF形態(tài)特性: 成纖維樣FOXC2
超敏游離雌三醇檢測試劑盒細胞名稱: 穩(wěn)定表達EBNA1的人胚腎細胞；293E形態(tài)特性: 上皮樣；多角uE3
成熟BNP檢測試劑盒細胞名稱: 表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞；293ET形態(tài)特性: 上皮樣；多角brain natriuretic peptide -32
成纖維細胞活化蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞；293KB形態(tài)特性: 上皮樣；多角Fibroblast Activation Protein
成纖維細胞生長因子10檢測試劑盒細胞名稱: 人胎盤絨膜癌細胞；BeWo形態(tài)特性: 上皮樣fibroblast growth factor-10
成纖維細胞生長因子19檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞；3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣fibroblast growth factor-19
穿孔蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: SV40轉化的非洲綠猴腎細胞；COS-1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Perforin 1
促紅細胞生成素抗體檢測試劑盒細胞名稱: SV40T轉化的人胚腎細胞；293T形態(tài)特性: 上皮樣Erythropoietin antibody
促甲狀腺激素受體抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸腺癌細胞；HCT116[HCT116]形態(tài)特性: 上皮樣；多角thyroid-stimulating hormone receptor antibody
促酰化蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人腎皮質近曲小管上皮細胞；HK-2形態(tài)特性: 上皮細胞樣acylationstimulatingprotein
單純皰疹病抗原2檢測試劑盒細胞名稱: 野生型人c-kit受體細胞株；A7d形態(tài)特性: 圓形Herpes simplex virus 2
大耳山羊肺細胞；LDG-1AC肉湯規(guī)格：250g用途：用于常見微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無菌試驗
哥倫比亞瓊脂對照培養(yǎng)基規(guī)格：13.2g/300ml/袋用途：培養(yǎng)基適用性實驗
放線菌培養(yǎng)基(改良高氏1號)規(guī)格：250g用途：用于放線菌的分離培養(yǎng)
霉素麥芽提取物瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于真菌的分離培養(yǎng)
莢膜染色液規(guī)格：5ml*4用途：用于莢膜染色
酵母浸出物葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于乳和乳制品中酵母菌和霉菌的計數
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