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產品名稱 | 小鼠胚胎成纖維細胞；Psi2DAP |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63908 |
細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞；Psi2DAP
形態(tài)特性: 成纖維細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這這株細胞生成一種可以感染小鼠細胞的載體。Psi2DAP細胞生成的載體編碼了人類胎盤堿性磷酸酯酶基因和*抗性基因。這株細胞通過Psi2細胞插入一個重組的逆轉錄病毒(DAP)基因組衍生而來。被這種Psi2DAP產生的載體感染的細胞表達的磷酸酯酶可用組織化學方法檢測，可以用作體內追蹤他們命運的標記。這些細胞也可能產生輔助病毒。檢測輔助病毒的方法或其他逆轉錄病毒技術，請參考Cepko,C.L.Lineageanalysisandimmortalizationofneuralcellsviaretroviru
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%*消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％*消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用*消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
趨化因子配體3檢測試劑盒細胞名稱: 珍珠龍膽石斑魚吻端組織細胞系；PGSN形態(tài)特性: 上皮樣ELISA Kit for ChemokineLigand 3
牙本質磷蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 鞍帶石斑魚腎臟組織細胞系；GGKD形態(tài)特性: 上皮樣dentin phosphoprotein
牙本質涎蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 草魚背鰭組織細胞系；GCDF形態(tài)特性: 上皮樣human dentin sialoprotein
順烏頭酶1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；9G2.5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣aconitase 1
丙激酶同工酶R;L檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；H1A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Pyruvate kinase isozymes R;L
CD320分子檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；2F8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cluster of differentiation 320
β2轉鐵蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；F3A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣β2 transferrin
性別決定區(qū)Y框蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；CH3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣SOX-1
骨骼肌肌動蛋白α1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；2F2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣smActinin-α1
α橫紋肌肌動蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；4G1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣α-sarcomeric actin
脊髓灰質炎病抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；1C8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣poliovirus antibody
乙型流感嗜血桿菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；4F2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Haemophilus influenzae type b antibody
腦膜炎雙球菌抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人癌多藥耐藥細胞株；MCF-7/ROS形態(tài)特性: 上皮樣Neisseria meningitidis antibody
囊泡單胺轉運蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 穩(wěn)定表達GFP的shRNA靶向干擾YB-1基因人肺腺癌A549細胞株；A549/YBX1-homo-326形態(tài)特性: 上皮樣Vesicular Monoamine Transporter 2
無翅型MMTV整合位點家族成員11檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株；1H9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11
5-羥色胺受體1B檢測試劑盒細胞名稱: 分泌抗豬SC蛋白單克隆抗體的雜交瘤細胞株；4H11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣5-Hydroxytryptamine Receptor 1B
抗*抗體檢測試劑盒細胞名稱: 過表達CADM1的骨肉瘤細胞株；U-2os-CADM1形態(tài)特性: 上皮樣Anti trypsin antibody
小鼠胚胎成纖維細胞；Psi2DAP長春質2468-21-5英文名：Catharanthine
英文別名：(+)-3,4-Didehydrocoronaridine
CAS登錄號：2468-21-5
分子式：C21H24N2O2
分子量：336.42
分子結構：
規(guī)格：20mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源：夾竹桃科植物長春花Catharanthus roseus (L.)G.Don的全草
藥理藥效：止痛、消炎、安眠、通便及利尿等。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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